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貨號 | AXB10416 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
產品名稱 | 昆蟲細胞;Hi-five(BTI-Tn-5B1-4) | 貨號 | AXB10416 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | Hi-fiveBTI-Tn-5B1-4:HifiveBTITn5B14 |
分類 | 昆蟲系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
生長特性 | 半貼半懸 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 |
詳情介紹 | Hi-five(BTI-TN-5B1-4)細胞是由武漢大學生命科學學院胡遠揚教授提交保藏。Hi-five(BTI-TN-5B1-4)細胞是一株昆蟲細胞,主要用于昆蟲病毒的擴增、病毒與宿主細胞相互作用的研究等。 |
生長培養(yǎng)基 | TNM-FH+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,100%; |
溫度 | 28℃ |
1 | |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮,需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品:
MHC I /H-2 I (Mouse major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Guinea pig IgG/Gold 膠體金標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.5ml
PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit 兔子前列腺素E2 96T
Metronidazole(1C2) 英文名稱: 單克隆抗體 0.1ml
ASGPR1 英文名稱: 唾液酸糖蛋白受體1抗體 0.1ml
Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠0酸化細胞分裂周期蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
apo-A1 ELISA Kit 大鼠載脂蛋白A1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ABCB6/FITC 熒光素標記ABCB6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FLASH/CASP8AP2 半胱蛋白酶8相關蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α 96T
Metronidazole 英文名稱:抗體 0.2ml
ATTY 英文名稱: 細胞酪酸轉酶抗體 0.2ml
Anti-ABCB6/FITC 熒光素標記ABCB6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
OT(Mouse oxytocin) ELISA Kit 小鼠催產素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CCR6/CD196/FITC 熒光素標記趨化因子受體6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ECM1 細胞外基質蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
OPG (Rabbit Osteoprotegerin) ELISA Kit 兔骨保護素 96T
METRN 英文名稱: Meteorin神經膠質細胞分化調節(jié)蛋白抗體 0.2ml
AADACL3 英文名稱: 芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體 0.2ml
Anti-CCR6/CD196/FITC 熒光素標記趨化因子受體6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ENG/sCD105(Mouse Soluble Endoglin) ELISA Kit 小鼠可溶性EndoglinMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
anti-p- Beta catenin/FITC 熒光素標記0酸化β-連環(huán)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh eIF6/ITGB4BP β4整合素結合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
TGF Beta2(Human transforming growth factors Beta2) ELISA Kit 人轉化生長因子β2 96T
Methamphetamine(4D2) 英文名稱: 甲基單克隆抗體 0.2ml
ABI2 英文名稱: 抑制基因ABI2/精酸酪酸蛋白激酶結合蛋白抗體 0.1ml
anti-p- Beta catenin/FITC 熒光素標記0酸化β-連環(huán)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
sCD30L ELISA Kit 大鼠可溶性CD30配體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
昆蟲細胞;Hi-five(BTI-Tn-5B1-4)Anti-AMPK Beta1/FITC 熒光素標記腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fascin1 纖維束1抗體 規(guī)格 0.1ml
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相關上皮趨化因子 96T
Methamphetamine 英文名稱: 甲基抗體 0.1ml
phospho-ATF2 (Thr51) 英文名稱: 0酸化活化復制因子2抗體 0.1ml
Anti-AMPK Beta1/FITC 熒光素標記腺苷單0酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染:把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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