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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>熒光定量PCR試劑盒>> 50T尼帕病毒(NIPAH)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

尼帕病毒(NIPAH)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-21 19:32:17瀏覽次數(shù):138次

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規(guī)格 50T 貨號 YS-P014477
品牌 YSRIBIO
尼帕病毒(NIPAH)檢測試劑盒(熒光-PCR法)原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
服務(wù)流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

尼帕病毒(NIPAH)檢測試劑盒(熒光-PCR法)

50T

YS-P014477

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

 

QQ截圖20191211135002.jpg 

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

心鈉肽(ANP)檢測試劑盒英文名稱:ANP ELISA Kitα2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1包裝1g

心肌營養(yǎng)素1(CT-1)檢測試劑盒英文名稱:CT-1 ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白3抗體包裝5g

心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱:cTn-Ⅰ ELISA Kit肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝1g

心肌肌鈣蛋白(cTn-Ⅰ)檢測試劑盒英文名稱:cTn-Ⅰ ELISA KitATP結(jié)合蛋白家族7抗體包裝25g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L3 ELISA KitASCL2蛋白抗體包裝5g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L2 ELISA Kit磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體包裝1g

小扁豆素結(jié)合型胎蛋白/胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)檢測試劑盒英文名稱:AFP-L1 ELISA Kit磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝100g

腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)檢測試劑盒英文名稱:AHCY ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

腺病毒IgG抗體(ADV IgG)檢測試劑盒英文名稱:ADV IgG ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝500g

纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒英文名稱:TAFI ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝25g

纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱:PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝5g

纖溶酶原激活劑抑制物(PAI-1)檢測試劑盒英文名稱:PAI-1 ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝10MG

纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒英文名稱:PAP ELISA Kit磷酸化活化復(fù)制因子2抗體包裝1mg

纖連蛋白(FN)檢測試劑盒英文名稱:FN ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體包裝5mg

細胞周期素D3(Cyclin-D3)檢測試劑盒英文名稱:Cyclin-D3 ELISA Kit活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體包裝5mg
尼帕病毒(NIPAH)檢測試劑盒(熒光-PCR法)Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit  人阿拉伯半乳糖蛋白麥角固 95%

Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit  人β乳球蛋白4-氯-2- 99%

Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit  人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白4-氯-2- 分析標準品,99.7%(HPLC)

Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP ELISA Kit  人淀粉樣前體蛋白2-氯-4- 98%

Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit  人β2糖蛋白2,5-二 97%

Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit  人α乳清蛋白3,4-二氯 98%

Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit   人N-酰-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸3,4-二氯 分析標準品

Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit  人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白鄰 99%


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