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真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片

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更新時間:2017-07-18 12:16:16瀏覽次數(shù):194次

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真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。

 

真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片產品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片DNA 擴增效率下降;
溫度低產量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設置特定反應的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結 合,長時間退火沒有必要。
15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α 50 ug     9。alpha。,11。alpha。,15R,19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15R),19R-hydroxy PGF1α; 15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α

7-methyl Guanosine 250 mg     7-

*溶液(10mg/ml)(6X10ML     Gentamicin Solution 10mg/ml), Contains 10mg/ml gentamicin. Sterile solution.

Zoledronic Acid hydrate 25 mg     P,P-[1-hydroxy-2-1H-imidazol-1-ylethylidene]bis-phosphonic acid, monohydrate; Zoledronic Acid hydrate

Eicosapentaenoic Acid methyl ester 500 mg     5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid methyl ester; EPA methyl ester; Eicosapentaenoic Acid methyl ester

N-[3,5-dimethyl-1-phenyl-1H-pyrazol-4-ylmethylene]-4- phenylmethyl-1-piperazinamine     SANT-1
FAAH Assay Buffer 10X 1 ea     Assay Buffer 10X); FAAH Assay Buffer 10X

單甲基化組蛋白H3K27多肽     Monomethyl Histone H3K27 Peptide 200 ul

DEPMPO-biotin 100 ug     N-[3-[[5-[3aS,4S6aR-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[2S,3R-2-diethoxyphosphinyl-34-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin

Boldenone Cypionate 50 mg     17β-hydroxy-androsta-1,4-dien-3-one cyclopentanepropionate

HA-1100 hydrochloride 10 mg     5-[hexahydro-1H-14-diazepin-1-ylsulfonyl]-12H-isoquinolinone, monohydrochloride Hydroxyfasudil; HA-1100 hydrochloride

10-methyl-9--phenoxycarbonyl) Acridinium fluorosulfonate (1 mg)     PMAC, 10-methyl-9--phenoxycarbonyl) Acridinium fluorosulfonate, 1-methyl-9-(phenoxycarbonyl)acridinium, fluorosulfate
384-Well Solid Plate low volume; black 25 ea     384-Well Solid Plate low volume; black

SR 1078 5 mg     N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-xy7noxy-1-trifluorometxyletxyl]pxenyl]-4-trifluorometxyl-benzamide

yenine 5。5馬來酰亞胺 [相當于Cy5。5馬來酰亞胺]     yenine 55 maleimide [equivalent to Cy5。5 maleimide]

Bisindolylmaleimide I 50 mg     3-[1-[3-dimetxylaminopropyl]-1H-indol-3-yl]-4-1H-indol-3-yl-1H-pyrrole-2,5-dione; BIM I|GF 109203X|G

O-Arachidonoyl Ethanolamine xy7nochloride 5 mg     O-2-aminoetxyl-5Z8Z,11Z,14Z-eicosatetraenester, monoxy7nochloride; Arachidonic Acid-2-aminoetxyl-ester|O-AEA|Virodhamine; O-Arachidonoyl Ethanolamine xy7nochloride

4-5H-Dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene-1-[4-2H-tetrazol-5-ylbutyl]-pipeni7ine     AT 56
TryptoseSoyaBroth

亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎 250(g) incubation media 亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎 250(g)

3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 3% NaC1賴氨酸脫羧酶發(fā)酵管 20 BR

改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗制造及生物制品霉菌無菌檢驗incubationmedia改良馬丁液體培養(yǎng)基250用于菌苗制造及生物制品霉菌無菌檢驗

ModifiedSkirrowAgarAdditives
吡哆醇Y培養(yǎng)基250g用于通過微生物學方法檢測吡哆醇含量

15050-057 500ml incubation media 15050-057 500ml

華根霉 /

亞鉍瓊脂平板(9cm)用于沙門氏菌的選擇性分離

YeastExtractGlucoseOxytetracyclineAgar
真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片YNBMedium

50060 牛肉浸膏 BR 500g 培養(yǎng)基原材料,含有多種微生物生長因子 incubation media 50060 牛肉浸膏 BR 500g 培養(yǎng)基原材料,含有多種微生物生長因子

副球菌 藥用 /

Cary-BlairTransportMedium

DG18Agar

真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次圖片變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復性,因而減少產量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設為 94 20~30 秒,高溫時間應盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95。 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結合

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