服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 分類(lèi) | 貨號(hào) |
豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）核酸檢測(cè)試劑盒 | 恒溫?zé)晒夥?/span> | FS-P10707 |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理：
?
擴(kuò)增曲線(xiàn)
在Real-time qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線(xiàn)，即為擴(kuò)增曲線(xiàn)。熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線(xiàn)期。
PCR反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系，所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
豬鏈球菌用于科研模式菌株: no豬鼻腔拭子提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2培養(yǎng)基: 396生長(zhǎng)條件: 37
-1444℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
干酪乳桿菌培養(yǎng)基: 6奶菌提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
灰離褶傘生長(zhǎng)條件: 25℃培養(yǎng)基: 0014提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no
解淀粉歐文氏菌生長(zhǎng)條件: 30℃，24h，好氧培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 20.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
致病性大腸埃希菌生長(zhǎng)條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
白茶新菇生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法
植物乳桿菌培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no牛奶提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
-1445℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
肺炎克雷伯菌肺炎亞種培養(yǎng)基: CM0051模式菌株: no痰提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2生長(zhǎng)條件: 36℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
黑木耳(8808)生長(zhǎng)條件: 25培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no 定期移植法
擬盤(pán)多毛孢培養(yǎng)基: 0014模式菌株: no植物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 18-26℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
刺盤(pán)孢屬培養(yǎng)基: 14模式菌株: no葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 26 定期移植法
洋蔥伯克霍爾德菌生長(zhǎng)條件: 30℃培養(yǎng)基: 2提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
鏈霉菌分類(lèi)學(xué)及微生物藥物學(xué)的研究模式菌株: no表面土壤提供形式: 其他安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃
-1446℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
澤瀉 ANIK，NF-kappaB-Inducing Kinase NFkB誘導(dǎo)的激酶（抗原） 磷化接頭蛋白Gab2IgG
澤瀉 BATF1 (Activating Transcription Factor1) 活化復(fù)制因子1 磷化接頭蛋白Gab 2IgG
左旋肉堿NKB (Neurokinins B) 神經(jīng)激肽B（抗原） 谷氨脫羧酶-65IgG
紫莖女貞苷AATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化復(fù)制因子2（多肽） 谷氨脫羧酶-65(C端多肽)IgG
紫莖女貞苷Bphospho-ATF2(pSer490/pSer498) 磷化活化復(fù)制因子2抗原 谷氨脫羧酶-67IgG
紫莖女貞苷CNKR ； Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor) 神經(jīng)激肽-B受體（抗原） 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因34IgG
標(biāo)準(zhǔn)品ATF3 (Activating Transcription Factor3) 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗原抗體
紫莖女貞苷DATM(ataxia telangiectasia mutated) 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗原 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45IgG
cis-紫莖女貞苷BATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因153IgG
藏紅花ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) 鈉鉀ATP酶通道蛋白抗原 神經(jīng)節(jié)肽“甘肽”IgG
豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）核酸檢測(cè)試劑盒Hydroxyurea/Hydroxycarbamide 羥基脲 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:3000
Hydroxyurea/Hydroxycarbamide 羥基脲（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:4000
ToremifeneCitrate 枸櫞托瑞米芬 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:80萬(wàn)-150萬(wàn)
ToremifeneCitrate 枸櫞托瑞米芬 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,M.W:90000
ToremifeneCitrate 枸櫞托瑞米芬（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,USP30
Ifosfamide 異環(huán)磷酰胺 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Ifosfamide 異環(huán)磷酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
Pramipexole2HCLmonohydrate 鹽普拉克索 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源馬心
Pramipexole2HCLmonohydrate 鹽普拉克索（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源牛心
VinblastineSulfate 硫長(zhǎng)春 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR，來(lái)源豬心
VinblastineSulfate 硫長(zhǎng)春(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BS
VinblastineSulfate 硫長(zhǎng)春(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BS
Temozolomide 替莫唑胺 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BS
Temozolomide 替莫唑胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,EP,BR
Aminoglutethimide 氨魯米特 質(zhì)量規(guī)格：>95%,mTOR抑制劑,BR
PCR檢測(cè)試劑盒：
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
