服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號 |
經(jīng)典豬瘟病毒(CSFV)RNA核酸檢測試劑盒 | 恒溫熒光法 | FS-P10700 |
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR技術(shù)的定量原理:?
擴增曲線
在Real-time qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
類干酪乳桿菌培養(yǎng)基: 6模式菌株: no菜發(fā)酵液提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
ATCC25849=BCRC14473=DSM1223=NCIMB10623=VKMB-1775模式菌株: yes安全等級: 1種屬: Eubacterium│barkeri淤泥提供形式: 凍干物模式菌株;Utilizes nicotinic acid培養(yǎng)基: 288
金針菇培養(yǎng)基: CM0017用于食用菌。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 25℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;定期移植法
運動替斯崔納菌參與石油烴類降解/生物活性物質(zhì)篩選模式菌株: no水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃
葡柄霉屬抗白色念珠菌模式菌株: no根提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 1培養(yǎng)基: MEA生長條件: 25C
紅菇生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;礦物油法
-1431℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
植物乳桿菌培養(yǎng)基: CM0006模式菌株: no奶提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ 真空冷凍干燥法
日本乙型腦炎病實驗研究其生物學活性,并進一步從基因水平上進行分析。模式菌株: no病料提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37
大腸埃希氏菌培養(yǎng)基: 0033遺傳工程;C600提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鐮孢屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28C -80℃冰箱凍結(jié)
蘇云金芽孢桿菌微生物殺蟲劑模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 2生長條件: 32℃
圓弧青霉生長條件: 25-28℃培養(yǎng)基: 14提供形式: 凍干物模式菌株: no產(chǎn)葡聚糖酶 真空冷凍干燥法;定期移植法
-1432℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
銅綠假單胞菌生長條件: 37℃培養(yǎng)基: CM0051提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no 真空冷凍干燥法
AS2.470培養(yǎng)基: 13模式菌株: no種屬: Hansenula│anomala提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 25-28℃ 真空冷凍干燥法
氧化前胡素GHRF (GHRH) 生長激素釋放激素(因子)(抗原) 纖維母生長因子5IgG
鹽伊立替康ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原 角質(zhì)形成生長因子受體/纖維母生長因子-7IgG
異夏佛塔苷GLUT4(Glucose transporter type 4) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4(抗原) 成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8IgG
乙氧基白屈菜紅堿GIP (Gastric Inhibitory polypeptide) 胃泌素抑制肽(抗原) 抗纖維母生長因子-13IgG
野馬追內(nèi)酯AANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2(多肽) 成纖維生長因子-10/纖維母生長因子-10IgG
油GLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原) 纖維母生長因子受體1IgG
標準品GRP94 (gp96) 94kDa 糖調(diào)節(jié)蛋白(抗原)抗體
月桂氮卓酮Annexin A 膜粘連蛋白 A抗原 磷酯酶Cγ1IgG
延胡索甲素G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白(鳥苷結(jié)合蛋白)(抗原) 磷酯酶Cγ2IgG
異橙黃酮GR (Glucocorticoid receptor) 糖皮質(zhì)激素受體 多肽 兔抗人、大、小鼠Crk p38IgG
經(jīng)典豬瘟病毒(CSFV)RNA核酸檢測試劑盒TamoxifenCitrate 枸櫞他莫昔芬 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
TamoxifenCitrate 枸櫞他莫昔芬(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Tandutinib 坦度替尼;MLN518 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Tandutinib 坦度替尼(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Teicoplanin 拉寧 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Teniposide 替尼泊甙,替尼泊苷 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Teniposide 替尼泊甙,替尼泊苷(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Tenofovirdisoproxilfumarate 富馬替諾福韋酯;泰諾福韋酯 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Tenofovir/Tenofovirdisoproxilfumarate 替諾福韋富馬(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Tenoxicam 替諾昔康 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Terbinafine 特比萘芬 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Terbinafine 特比萘芬(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
TerbinafineHCl 鹽特比萘芬 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
TerbinafineHCl 鹽特比萘芬(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Teriparatideacetate/HumanPTH(1-34) 醋特立帕肽/重組人甲狀旁腺激素(1-34) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
PCR檢測試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。