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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

15000017673

當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>克隆相關(guān)>> RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)

RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)

參  考  價(jià):1248
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

  • 品牌

  • 廠(chǎng)商性質(zhì)

    經(jīng)銷(xiāo)商

  • 所在地

    上海

規(guī)格

10T 1248元 10盒可售

更新時(shí)間:2023-11-30 14:33:29瀏覽次數(shù):296次

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產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RTS BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)產(chǎn)品儲(chǔ)存:TRzol在室溫下能穩(wěn)定保存12個(gè)月。盡管如此,為達(dá)到最佳效果,我們建議保存在2-8℃的環(huán)境下。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

產(chǎn)品分類(lèi)

規(guī)格

貨號(hào)

RTS   BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)

克隆相關(guān)

10T

BJ-PJ6651

 

描述:BL21(DE3) Chaprone 感受態(tài)細(xì)胞中含有分子伴侶蛋 白質(zhì)粒,其表達(dá)產(chǎn)物可協(xié)助重組蛋白正確折疊形成可溶活性 蛋白。分子伴侶蛋白質(zhì)粒為抗性(chloramphenicol, Cmr)的表達(dá)受控于四環(huán)素(tetR)操縱子,因此該感受態(tài) 不適用于抗性表達(dá)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。 本品使用  的化學(xué)感受態(tài)技術(shù)制備, 其室溫可保存 3 天、-20°C 可保存 2 年(推薦保存溫度)、 -80°C 可長(zhǎng)期保存性能無(wú)下降。運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需干冰,可常 規(guī)冰袋運(yùn)輸(推薦運(yùn)輸溫度)。該感受態(tài)細(xì)胞為熱激感受態(tài) 細(xì)胞,轉(zhuǎn)用于蛋白表達(dá)(不可用于克隆和載體構(gòu)建),經(jīng) 42°C 熱激 1min 可獲得 105~106 cfu/μg 效價(jià),可滿(mǎn)足質(zhì)粒轉(zhuǎn)化要 求。該制品使用簡(jiǎn)單、運(yùn)輸、儲(chǔ)存方便。 

組分
RTS BL21(DE3)Chaprone Competent Cell(10T) 1 瓶
Nano E.coli Transfection Reagent 1 mL
儲(chǔ)存:RTS 系列感受態(tài)為干粉形式,均可室溫保存 3 天,長(zhǎng)期保存-20°C(2 年)。經(jīng) Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受態(tài)必須分裝后,并于-60°C 以下保存。溶解后的感受態(tài)細(xì)胞避免反復(fù)凍融,在-60°C 以下可保存 6 個(gè)月。
操作方法
1. 從-20°C 冰箱中取出 Nano E.coli Transfection Reagent融化,放置于冰上。取 300 μl Nano E.coli TransfectionReagent 加入到一支凍干感受態(tài)細(xì)胞中,并分裝到 10 支 1.5ml EP 管中(每支 30 μl),于-60°C 以下保存(或立即使用)。
2. 將 10~100 ng 質(zhì)粒 DNA(不可使用連接產(chǎn)物、不可使用篩選標(biāo)記質(zhì)粒)加入到分裝的感受態(tài)細(xì)胞中,輕彈EP 管(或槍頭輕輕吹打),置于冰上 15min。
3. 置于 42°C 熱激 1 min 后,迅速置于冰上急冷 2 min。
4. 熱激完畢后,向上述感受態(tài)細(xì)胞中加入 450 μL 不含抗生素的 SOC(或 LB)培養(yǎng)基,37 °C 振蕩(225 rpm)培養(yǎng)60 min。使質(zhì)粒上抗性標(biāo)記基因表達(dá),菌體復(fù)蘇。
5. 取200 μl復(fù)蘇菌液涂布到含相應(yīng)抗生素的LB瓊脂平板表面。(含相應(yīng)質(zhì)??股睾?20 μg/ml )
6. 將平板置于 37 °C 培養(yǎng),12~18 小時(shí)后可出現(xiàn)菌落。
7. 挑選生長(zhǎng)良好的菌落,接入 LB 培養(yǎng)基(含相應(yīng)質(zhì)??股?,20 μg/ml),37 ℃劇烈振蕩培養(yǎng)過(guò)夜。
8. 1/50 比例接入新的 LB 培養(yǎng)基(含相應(yīng)質(zhì)??股?,20μg/ml ,0.5 mg/ml L-阿拉伯糖)37 ℃劇烈振蕩培養(yǎng)至菌體密度 OD600 約 0.3(約 2h)。
9. 加入終濃度 2 ng/ml 四環(huán)素(誘導(dǎo) chaprone 伴侶蛋白表達(dá)),37℃劇烈振蕩培養(yǎng)至 OD600 約 0.5(約 2~4h)。
10. 加入適量 IPTG(0.1-1 mM), 15℃振蕩培養(yǎng) 24h(培養(yǎng)搖床無(wú)法制冷條件下,室溫誘導(dǎo) 8~12h)。
11. 4,000 rpm 室溫離心 15 min,收集細(xì)胞,進(jìn)行蛋白表達(dá)和可溶性表達(dá)分析。


下列是公司正在出售的產(chǎn)品:

鋅指蛋白230抗體 英文名;RNF141/ZNF230

細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白2抗體 英文名;CPEB2

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子19抗體 英文名;CEACAM19

Toll樣受體6抗體 英文名;TLR6

CSMD3蛋白抗體

酪啡肽β/?-casomorphin抗體

磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體 英文名;Phospho-DARPP32   (Thr34)

APC標(biāo)記小鼠H-2Db單克隆抗體

CSMD2蛋白抗體 英文名;CSMD2

跨膜蛋白Sema3C抗體 英文名;Sema3C

微管相關(guān)同源蛋白TPX2單克隆抗體 英文名;TPX2

APC標(biāo)記小鼠CD90單克隆抗體 英文名;mouse CD90/APC

RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白C抗體 英文名;RRAGC

松弛肽/松弛素抗體 英文名;Relaxin 1 + Relaxin 2

膠原樣蛋白抗體

PE-Cy7標(biāo)記人/小鼠CD11b單克隆抗體 英文名;human/mouse   CD11b/PE-Cy7

型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體

肌動(dòng)蛋白依賴(lài)染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體

間隙連接蛋白26/GJB2抗體 英文名;Connexin 26

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框163抗體

型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白/III型膠原抗體 英文名;Collagen III

磺氨基葡糖硫酸胺酶抗體 英文名;SGSH

纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物3抗體

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框162抗體 英文名;C1orf162

鋅指蛋白430抗體

RTS   BL21(DE3)Chaprone助溶表達(dá)感受態(tài)磷酸化剪接因子1抗體

 


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